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            MoBio NoviPure™土壤蛋白質(zhì)提取試劑盒 NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit
          MoBio產(chǎn)品 / 土壤總蛋白提取試劑盒

          提取各種類(lèi)型土壤蛋白,不受腐殖質(zhì)等干擾雜質(zhì)影響。

          提取次數: 貨號:
          20 次 30000-20
          產(chǎn)品特點(diǎn)
          • 強力裂解 - 采用優(yōu)化的珠磨研磨方法,可高效裂解真菌、革蘭氏陰性菌及革蘭氏陽(yáng)性菌細胞并溶解菌體總蛋白
          • 快速簡(jiǎn)便提取總蛋白 - 新型離心柱方法提取蛋白質(zhì)過(guò)程無(wú)需沉淀,全程僅需22 min
          • 結果精確 -所得蛋白質(zhì)可用于質(zhì)譜分析、一維和二維電泳、以及其他蛋白組學(xué)相關(guān)應用
          描述

          NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit專(zhuān)門(mén)設計用于所有類(lèi)型土壤微生物胞外、胞內蛋白提取,不受腐殖質(zhì)等干擾雜質(zhì)影響。正在申請專(zhuān)利的雙緩沖液提取法加上玻璃珠、陶瓷研磨珠能高效裂解細胞,并溶解所有胞外、胞內蛋白質(zhì)。相對于SDS水煮、熱蒸汽與NaOH結合等傳統提取方法,最終蛋白沉淀非常干凈不含雜質(zhì)。加入緩沖液重懸蛋白沉淀后可用于進(jìn)一步分析或保存。使用NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit提取的蛋白質(zhì)已經(jīng)成功地在一維電泳和質(zhì)譜分析法(2D LC-MS/MS)中使用。為保護珍貴樣品,所有試劑及塑料制品都不含任何蛋白酶或蛋白。試劑盒說(shuō)明書(shū)專(zhuān)門(mén)優(yōu)化提取變性蛋白,要提取天然蛋白只需對操作流程進(jìn)行少許修改即可。

          研究與深入

          圖1:使用NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit提取堆肥樣品獲得更干凈的蛋白質(zhì)


          (A) NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit試劑盒法(條帶1、2)與蔗糖、苯酚提取法①(條帶4、5)分別提取兩個(gè)加入白念球菌(C. albicans)的5g預先滅菌堆肥樣品總蛋白。NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit(條帶3)與蔗糖、苯酚法(6)再提取白念球菌(C. albicans)純培養作為對照。

          (B) NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit試劑盒法(條帶1、2)與SDS煮沸提取法(條帶3、4)分別提取兩個(gè)加入大腸桿菌(E. coli)的5g預先滅菌堆肥樣品總蛋白。

          每樣取20μl總蛋白跑一維SDS-PAGE電泳,Stain Free凝膠成像系統③可視化處理。NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit所獲得的蛋白背景清晰無(wú)拖尾,可見(jiàn)蛋白條帶?梢(jiàn)腐殖質(zhì)等干擾雜質(zhì)非常少。

          圖2:使用NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit提取復雜類(lèi)型土壤樣品獲得高蛋白質(zhì)得率

          使用NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit提取加入了大腸桿菌(E. coli)的5g預先滅菌土壤及沉積物的總蛋白。每樣取20μl總蛋白跑一維SDS-PAGE電泳,Stain Free凝膠成像系統③可視化處理。所有樣品都能獲得清晰蛋白條帶,并與大腸桿菌純培養陽(yáng)性對照相符。(條帶1、2)- 淡水湖沉積物;(3、4)- 瀉湖沉積物;(5、6)- 沙灘沙子;(7、8)- 大田土壤;(9、10)- 大腸桿菌純培養。

          圖3:使用NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit提取的蛋白質(zhì)在二維凝膠電泳中獲得成功結果

          使用NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit提取加入了大腸桿菌(E. coli)的5g預先滅菌土壤及沉積物的總蛋白。每樣取20μl總蛋白,pH3-10 二維SDS-PAGE電泳后銀染分析?梢(jiàn)蛋白質(zhì)清晰可見(jiàn)無(wú)腐殖質(zhì)等干擾物。

          圖4:使用NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit提取的蛋白質(zhì)在2D LC - MS/MS中獲得精確的結果

          蛋白質(zhì)質(zhì)譜峰圖。為強陽(yáng)離子交換分離后的一部分。由NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit 提取5g加入E. coli滅菌堆肥的總蛋白,胰蛋白酶酶解成肽段,再對這些肽段用2D-MS/MS進(jìn)行鑒定與分析。原色譜比對SWISSPRO數據庫(最新版本2013年5月)。結果鑒定出1076種不同蛋白。

          ①Taylor & Williams, 2013 Microb. Ecol. 59:390-99

          ②Chourey et al. 2010 J. Proteome Res. 9:6615-22

          ③BIORAD mini PROTEAN® TGX Stain-Free™ Gels


          土壤微生物胞內、胞外總蛋白提取

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          規格
          提取方法 專(zhuān)利申請中的雙緩沖液提取法
          細胞破碎 研磨珠破碎
          處理樣品量 2-5g
          儀器要求 渦旋混合儀
          適配器(50ml)
          50ml 管離心機(4500×g)
          小型離心機(20000×g)

          保存條件
          室溫(15-30℃)保存。SP1和SP2溶液使用前先冷藏。
          試劑盒組分
          組分 30000-20
          NoviPure™ Bead Tubes
          Solution SP1
          Solution SP2
          50ml Falcon™ Collection Tubes
          1.7ml Low-Protein Binding Tubes
          20
          500ml
          32ml
          40
          20

          產(chǎn)品介紹彩頁(yè)
          MOBIO NoviPure soil Protein 土壤微生物胞內、胞外總蛋白提取試劑盒產(chǎn)品介紹彩頁(yè)
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